IF=56.1！上海交大仁济医院/肿瘤所团队揭示肝癌免疫治疗增敏新靶点STK40

杂志名称： Cancer Cell

影响因子： 56.1

文章题目： Targeting tumor-intrinsic STK40 induces immune vulnerability and drives T cell reinvigoration

第一作者： 祝丽丽

通讯作者： René Bernards院士, 杨宇研究员, 覃文新研究员, 王存研究员

作者单位： 上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市肿瘤研究所、荷兰癌症研究所等

究所使用的产品：细胞因子抗体芯片（RayBio AAM-CYT-1000，检测小鼠样本中96个微量表达功能细胞因子）

实验样品类型： 细胞上清

1、体内CRISPR筛选鉴定STK40为HCC免疫逃逸的关键调控因子

研究者构建了靶向566个激酶基因的sgRNA文库，在免疫健全与免疫缺陷小鼠中进行体内筛选。结果显示，STK40是免疫选择压力下最显著缺失的基因之一，且其缺失在多种HCC模型（Hepa1-6、Hep53.4）中显著抑制肿瘤生长，并与抗PD-1治疗协同诱导肿瘤完全消退及免疫记忆建立。

2、STK40缺失增强CD8⁺ T细胞介导的肿瘤杀伤

通过CD8⁺ T细胞清除实验和OT-I T细胞过继模型，证实STK40缺失对肿瘤生长的抑制完全依赖于CD8⁺ T细胞。体外共培养和体内竞争实验均表明，STK40缺陷的肿瘤细胞对CD8⁺ T细胞杀伤更为敏感。

3、STK40通过COP1介导IFNGR1泛素化降解，抑制肿瘤细胞对IFN-γ的响应

转录组分析显示，STK40缺失后，IFN-γ响应通路显著富集。Co-IP实验证实STK40作为适配蛋白，桥接E3泛素连接酶COP1与IFNGR1，促进IFNGR1的多泛素化和蛋白酶体降解。STK40缺失稳定了IFNGR1蛋白，恢复肿瘤细胞对IFN-γ的敏感性，从而增强CD8⁺ T细胞杀伤效能。IFNGR1回补或敲除实验进一步验证了该通路的因果重要性。

4、STK40缺失通过上调GM-CSF增强cDC1介导的CD8⁺ T细胞活化

单细胞RNA测序显示，STK40缺失的肿瘤中CD8⁺ T细胞和cDC1浸润显著增加，且DC-T细胞间通讯增强。转录组和细胞因子抗体芯片分析发现（RayBio AAM-CYT-1000），STK40缺失显著上调GM-CSF（由Csf2编码），其通过激活NF-κB通路驱动Csf2转录。体内实验表明，敲除Csf2或清除cDC1（Batf3⁻/⁻小鼠或cDC1特异性敲除Csf2rb）均完全消除STK40缺失带来的抗肿瘤效应，证明GM-CSF-cDC1轴是STK40缺失介导T细胞活化的关键通路。

5、靶向STK40（LNP-siRNA）联合PD-1阻断在多种肿瘤模型中有效

鉴于STK40为假激酶，暂无小分子抑制剂，研究者开发了LNP包封的siRNA（LNP-siStk40）。在皮下和自发HCC模型中，LNP-siStk40显著抑制肿瘤生长，联合抗PD-1进一步增效。在患者来源肝癌类器官（PDO）与PBMC共培养体系及PDX人源化小鼠模型中，LNP-siSTK40同样增强IFNGR1表达、促进GM-CSF分泌、降低类器官活力并抑制PDX生长。此外，在结直肠癌（MC38）、胰腺癌（Panc02）和乳腺癌（EMT6）模型中，STK40敲除或LNP-siStk40同样增强免疫浸润和抗肿瘤效果，表明STK40是一个广谱免疫逃逸调控靶点。