麻省理工/哈佛团队发现：Intelectin-2 竟是双重功能的“屏障加固者”与“广谱杀菌剂”

杂志名称：Nature Communications

影响因子：18.1

文章题目：Intelectin-2 is a broad-spectrum antimicrobial lectin（内凝集素2 是一种广谱抗菌凝集素）

第一作者：Amanda E. Dugan, Deepsing Syangtan

通讯作者：Laura L. Kiessling

作者单位：麻省理工、哈佛大学、加州大学等

本实验所用产品：GA-Glycan-300（检测样本与300种糖基结合的多因子芯片）

实验样品类型：重组小鼠 intelectin-2（mItln2）

1、小鼠Itln2在Th2炎症条件下显著诱导表达

研究人员发现IL-4和IL-13刺激携带完整Itln1-6基因座的B6.C-Itln1-6小鼠模型肠道类器官后，Itln2转录水平上调约40倍，占全部Itln转录本的30%，而Itln1仅为组成型表达。这表明Itln2在Th2型免疫应答（如寄生虫感染和过敏）中具有条件性诱导特征。

2、Itln2特异性识别末端β-D-半乳糖吡喃糖（β-Galp）结构，可交联黏蛋白，增强黏膜屏障

将hItln2与微生物糖芯片（NCFG）、哺乳动物糖芯片（CFG v5.5）及mItln2与RayBio糖芯片（GA-Glycan-300）进行孵育后筛选、结合ELLA及BLI实验验证，发现mItln2和hItln2均结合含末端β-Galp（β半乳糖苷）或6-硫酸化β-Galp的糖链，而不结合β-半乳糖呋喃糖（β-Galf，为Itln1的配体）。结构分析显示，Itln2结合口袋中芳香族残基被替换（W288A或S309Y），使其对吡喃糖形式具有选择性，解离常数约为1.5–3.9 μM。

Itln2以钙离子依赖性方式结合MUC2、MUC5AC和MUC5B，并在体外诱导黏蛋白聚集和交联。时间延迟共聚焦成像和光散射实验表明，Itln2可快速形成黏蛋白-凝集素复合物，该活性可被游离半乳糖竞争性抑制，提示其在黏膜屏障加固中的“防御性”角色。

3、Itln2具有广谱杀菌活性，选择性地杀伤微生物

流式细胞术和显微镜显示，mItln2和hItln2可结合多种革兰氏阳性及阴性菌，包括共生乳杆菌、条件致病菌肺炎克雷伯菌和耐甲氧西林球菌（MRSA）。CFU和生长曲线测定表明，mItln2在微摩尔浓度下即可显著降低活菌数，并诱导细菌膜完整性丧失和内容物泄漏，而对哺乳动物细胞无毒性。脂质体破坏实验证实其杀菌作用依赖于糖识别和膜裂解活性。

4、hItln2在炎症微环境（低pH、低盐）中活性增强

在模拟结肠炎或溃疡性结肠炎的酸性及低盐条件下，hItln2仍保持折叠和糖结合能力，且黏蛋白交联和细菌凝集活性显著增强，杀菌效果更佳。提示其在炎症性肠病中可能发挥重要的保护作用。