IF 17.1！复旦大学中山医院揭示肝癌仑伐替尼耐药新机制：UBTF-HSP90A-MIF应激回路驱动免疫“冷”肿瘤形成

杂志名称：Journal of Advanced Research

影响因子：17.1

文章题目：UBTF-HSP90A-MIF stress circuit drives lenvatinib resistance and immune exclusion in hepatocellular carcinoma（UBTF–HSP90A–MIF应激回路驱动肝细胞癌仑伐替尼耐药及免疫排斥）

第一作者：Shipin Chen, Biao Wang, Yanfei Wu等

通讯作者：Yang Zhang, Shisuo Du

作者单位：复旦大学中山医院肝癌研究所、癌变与癌侵袭教育部重点实验室、华山医院核医学科&PET中心；同济大学医学院上海市肺科医院肿瘤科，中国科学院杭州医学研究所浙江省肿瘤医院放疗科等

本实验所用产品：RayBio Human Cytokine Antibody Array C1000（AAH-CYT-1000，检测120种人类细胞因子）

实验样品类型：肝癌细胞系培养上清（MHCCLM3、Hep3B、PLC/PRF/5）

1、仑伐替尼耐药HCC细胞中MIF蛋白及分泌水平显著升高

通过长期药物暴露建立仑伐替尼耐药HCC细胞系（LR），其IC₅₀值显著升高，集落形成能力增强。转录组测序及细胞因子抗体芯片筛选（RayBio AAH-CYT-1000 120种因子）发现MIF是LR细胞中上调最显著的分泌蛋白之一。Western blot及ELISA验证了LR细胞内MIF蛋白及培养上清中MIF浓度均显著升高，而mRNA水平无显著变化，提示存在转录后调控。临床组织芯片显示MIF在HCC中高表达，且高MIF表达与总生存期及无病生存期缩短显著相关，TCGA-LIHC队列验证一致（图1）。

2、MIF敲低可抑制耐药细胞增殖、诱导凋亡，并恢复仑伐替尼敏感性（体外及体内）

在三种耐药细胞系中，MIF敲低联合仑伐替尼显著减少EdU掺入、集落形成，并诱导凋亡；异种移植模型中联合治疗组肿瘤体积及重量抑制最明显。

3、UBTF转录激活HSP90A通过稳定MIF驱动LR细胞增殖及耐药

Co-IP、PLA及免疫荧光、启动子pull-down证实MIF与HSP90A在LR细胞质中共定位，表达呈正相关。

4、MIF–CD74轴通过PI3K/AKT及MAPK通路驱动耐药

MIF敲低降低PI3K、AKT、ERK1/2、p38磷酸化；Co-IP/PLA证实MIF–CD74复合物；4-IPP联合仑伐替尼显著抑制类器官生长及异种移植瘤增殖。

4、UBTF–HSP90A–MIF轴作为治疗干预及生物标志物开发的理论基础

在Alb-Cre;Mif^(flox/flox)自发肝癌模型中，MIF缺失联合仑伐替尼+抗PD-1治疗组肝重/体重比、肿瘤结节数下降最显著，生存期最长。综上，UBTF–HSP90A–MIF轴将蛋白质稳态、细胞因子信号与免疫代谢紊乱整合为一个统一的耐药程序，区别于单一激酶旁路激活模型。MIF作为可靶向节点及预测标志物，为仑伐替尼–PD-1基础上联合MIF或HSP90A抑制剂提供了机制依据和临床转化路径。