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科研辅助的利刃剑—抗体芯片

人阅读 发布时间:2022-03-09 17:41

抗体芯片   是蛋白芯片的一种,具有微型化、集成化、高通量化的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,主要用于信号转导、蛋白质组学、肿瘤及其他疾病的相关研究。该芯片在化学修饰的固相片基上共价结合高度特异的细胞因子捕获抗体,通过高亲和的配对二抗进行信号放大,以实现对微量细胞因子的有效检测。进一步,利用梯度稀释的标准品检测信号构建标准曲线,通过标准曲线拟合的方式,实现目标样本中多重细胞因子的准确定量检测。目前,RavBiotech 验证的抗体对大概有 1000 多种抗体对,基干双抗体夹心法开发的半定量芯片有 200 多种,定量抗体芯片有 100 多种,涵盖的因子 1000 多个,包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。
 

抗体芯片特点: 

1.  每种抗体设置 4 次技术重复;

2.  可根据研究要求定制个性化芯片;

3.  双抗夹心 & 荧光检测法有效检测微量指标,下限达 pg/mL;

4. 50 μL 的液质样本、200 μg 的总蛋白量即可完成多指标检测;

5.  适用于血清/浆、培养上清及细胞、组织裂解液等多种生物样本;

6.  可以有效避免采用传统方法所引入的批次间实验误差;

7.  可大限度扩大单个样本的信息量并可做不同分析物间的交互分析。

 

抗体芯片原理:  

1.  抗体芯片根据不同原理分为双抗夹心法和标记法;夹心法芯片使用原理是一对匹配的抗体进行靶蛋白检测。

 

2.  不同于夹心法,标记法使用第二种生物素化抗原特异性抗体,样品蛋白本身在与捕获抗体孵育之前被生物素标记。蛋白质结合芯片可以检测使用 HRP 检测或 CY3 检测。通过简单的标记过程,样品蛋白直接与生物素结合,而且不需要第二抗体来产生信号。




 

 

Raybiotech  新品推出:

药物抗体 (Drug Antibody ,DA) 是一种直接或间接引起疾病特异性细胞破坏的抗体。也称为治疗性抗体,DAs 的主要作用机制是与目标细胞上称为「抗原」的独特靶分子发生特异性和稳定的相互作用,该分子诱导细胞凋亡或募集免疫细胞以破坏靶细胞。因此,DAs 是一种免疫疗法,其副作用比全身性药物(例如化疗)少,后者现在占所有新药批准的五分之一。

可以通过修饰增加递送特异性、提高结合亲和力或导致药物偶联物的叠加效应来进一步增强 DA 的治疗效果。例如,DA 可以作为一种传递系统,将其放射性核素偶联物直接输送到肿瘤细胞,从而使健康组织免受不必要的辐射。

DA 检测可表征 DA 的结合、识别候选 DA 或监测 DA 批次间的变异性。例如通过间接 ELISA(图 2)进行 EC50 检测。
 

图 2. 根据要求,可以使用 RayBiotech 的产品与服务计算 EC50。

 

药物抗体 (Drug Antibody ,DA) 检测试剂盒

 

抗药抗体 (Anti-Drug Antibody ,ADA) 可在用 DA 反复治疗后由身体产生。ADAs 通过降低其浓度或干扰其与靶分子的结合来降低 DA 的功效。干扰 DA 结合的 ADA 被称为中和抗体。因此,鉴定具有低免疫原性的 DAs 或具有最小产生免疫反应倾向的 DAs 在药物发现中至关重要。

首先用检测内源性 ADA 与 DA 结合的测定法筛选 ADA。如使用流式多因子进行 ADA 检测(图 3)。 
 


图 3. 直接法或竞争法流式多因子检测技术研究 ADA。


ADA 的进一步表征包括滴定、中和、同型分析和交叉反应性检测等。ADA 滴度和中和活性可以提供对 DA 的药代动力学、药效学、安全性和治疗功效的重要见解。可以通过多肽芯片来改进药物设计,它可以识别 DA 的免疫原性区域(图 4)。
 


图 4. 多肽芯片研究 ADA 结合位点。

 

确定 DA 靶向哪些内源性和外源性蛋白质的交叉反应性测定可以指导患者护理。
 

抗药抗体 (Anti-Drug Antibody ,ADA) 

 

现折优惠:

标记法高通量抗体芯片

RayBiotech 将直接抗原标记技术与我们庞大的芯片抗体抗体库相结合,创造了迄今为止最大的抗体芯片。利用 L 系列高密度芯片平台,研究人员现在可以同时检测多达 6000 种蛋白质,从而获得蛋白质广泛的表达谱。L6000 标记法芯片非常适合生物标志物发现研究和探索性筛选。

只需要准备一份样本,一次实验就能够检测 6000 个蛋白质的表达!
 

 

 

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在科研领域,RayBio 累计支持客户发表影响因子 3 分以上的 SCI 文章超过 10000 余篇,影响因子超过 47001 分,影响因子 >5 的文章超过 4167 篇,影响因子 >15 的文章超过 475 篇,影响因子 >20 的文章超过 174 篇。RayBio 作为国际蛋白芯片和免疫产品专业供应商,拥有世界上种类最多的抗体芯片及 ELISA 及产品,其产品检测灵敏度高,种属多样,包括涵盖人、小鼠、大鼠、猪、马、牛、猴、犬、猫、兔等多个种属。


文献分享:

1.Moicsko K., Bordry N., Gfeller D., et al. Baseline serum predictors of clinical response to CTLA4 inhibitor therapy in melanoma patients. Journal of Clinical Oncology 33, no..15_suppl (May 20 2015) 3025-3025

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